叫做蛋白質(zhì)體外結(jié)合實驗,是體外驗證/尋找互作蛋白的技術(shù),在體外條件下檢測蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間相互作用的方法。通過SDS-page電泳分析,或結(jié)合WB和MS檢測,可驗證蛋白間的相互作用或篩選獲取相應(yīng)的目的蛋白,因此適用范圍廣。
主要應(yīng)用
1、驗證兩個已知蛋白的相互作用
2、篩選與已知蛋白相互作用的未知蛋白
3、研究兩個已知蛋白相互作用位點
原理
GST pull down原理示意圖
利用重組技術(shù)將探針蛋白與GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通過GST與固相化在載體上的GTH(Glutathione)親和結(jié)合。因此,當(dāng)與融合蛋白有相互作用的蛋白通過層析柱時或與此固相復(fù)合物混合時就可被吸附而分離。
客戶提供
1、若是驗證兩種蛋白質(zhì)間相互作用,需提供誘餌蛋白質(zhì)及捕獲蛋白質(zhì)表達載體;若是驗證目的蛋白與細胞裂解物蛋白互作,捕獲蛋白質(zhì)表達載體和含有誘餌蛋白的細胞裂解上清或者其它。若無,提供目的蛋白信息,由我公司負責(zé)構(gòu)建表達載體,
2、若是驗證兩種蛋白質(zhì)間相互作用,需提供捕獲蛋白一抗。
美軒提供
1、SDS-PAGE、western blot結(jié)果或質(zhì)譜分析
2、實驗報告