染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)(chromatin-immunoprecipitation,Chip),因其能真實(shí),完整地反映結(jié)合在DNA序列上靶蛋白的調(diào)控信息,是研究體內(nèi)DNA-蛋白質(zhì)相互作用的實(shí)驗(yàn)技術(shù),通常用于轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)或組蛋白特異性修飾位點(diǎn)的研究。
原理
CHIP原理示意圖 |
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1、樣本:細(xì)胞,1*107個(gè)細(xì)胞或75cm2培養(yǎng)瓶一瓶;組織,需根據(jù)組織樣本能提出的染色質(zhì)量決定,動(dòng)物組織>0.2g,植物組織>5g,干冰運(yùn)輸
2、抗體:質(zhì)量比較高,至少是CHIP級(jí)別的抗體,即我們?cè)诓樵兛贵w時(shí)需有“ChIP-Grade”標(biāo)識(shí)
3、若研究已知靶基因,提供基因的信息(ID號(hào))和預(yù)測(cè)位點(diǎn)。
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1、DNA提取效果圖和超聲波破碎圖
2、采用PCR鑒定方法:電泳圖或溶解曲線
采用高通量測(cè)序:數(shù)據(jù)包和分析結(jié)果
3、實(shí)驗(yàn)報(bào)告
超聲波裂解